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本试剂盒可测各种果汁、蜂蜜、精浆、组织等样本中果糖。


果糖主要来源于精囊腺的分泌，是精液的主要糖分，是精子的重要营养成分之一。精浆果糖含量与精子活动力有显著的相关性，精浆果糖含量的高低能直接影响精子的活动力，是其动力好坏的一个重要因素。同时果糖是天然糖品中甜度最高的糖，相当于蔗糖的1.8倍，糖类的组成是衡量果汁及蜂蜜质量的重要指标。测定方法的建立对蜂蜜质量控制及果汁中果糖含量的检测具有重要意义。

• 快速简便：全程约20分钟，可测50例左右样本。
  
• 取样量微：本法取样本量仅为50μL即可
  
• 稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
  
• 再现性好：变异系数CV=1.5%。
  
• 回收试验：X =102%。

组分	规格
基质反应液	2×75mL
D-果糖标准品粉剂	3×10mg

保存：4℃


试管、微量移液器、旋涡混匀器、100℃水浴箱(气浴箱)、可见分光光度计(285nm)。


1mg/mL果糖标准液：临用前，1支D-果糖标准品粉剂加10mL双蒸水，即可配制成1mg/mL的果糖标准液，现配现用。

• 按下表加入各成分，配制反应体系。
  

  成分	空白管	标准管	测定管
  双蒸水	50μL
  1mg/mL果糖标准液		50μL
  待测液			50μL
  基质反应液	3mL	3mL	3mL

  
  
• 充分混匀，沸水浴准确水浴8分钟，流水冷却。
  
• 285nm处，1cm光径，空白管调零，测各管OD值。

• 果汁、蜂蜜、精浆等样本计算公式：
  

  果糖含量 (mg/mL)	＝	OD值测定管	×	标准品浓度 (1mg/mL)	×样本测试前稀释倍数
  		OD值标准管

  
  
• 动物组织样本计算公式：
  

  组织中果糖含量 (mg/g蛋白)	＝	OD值测定管	×	标准品浓度 (1mg/mL)	÷	20%匀浆蛋白浓度 (gprot/mL)
  		OD值标准管

• 果汁中果糖含量的测定
  
  • 前处理：取新鲜水果榨汁，3500转/分，离心10分钟，取上清液待测。
    
  • 计算举例：
    取新鲜哈密瓜果肉榨汁，3500转/分，离心10分钟，取上清液用双蒸水100倍稀释待测，实验测得标准管OD值为0.267，测定管OD值为1.101，则计算结果如下：
    

    果汁中果糖含量 (mg/mL)	＝	OD值测定管	×	标准品浓度 (1mg/mL)	×样本测试前稀释倍数
    		OD值标准管
    	＝	0.101	×1×100＝37.83mg/mL
    		0.267

• 蜂蜜中果糖含量的测定
  
  • 前处理：取蜂蜜用双蒸水1000倍稀释后待测。
    
  • 计算举例：
    取蜂蜜用双蒸水1000倍稀释后待测，实验测得标准管OD值为0.267，测定管OD值为0.271，则计算结果如下：
    

    蜂蜜中果糖含量 (mg/mL)	＝	OD值测定管	×	标准品浓度 (1mg/mL)	×样本测试前稀释倍数
    		OD值标准管
    	＝	0.271	×1×1000＝1014.98mg/mL
    		0.267

• 精浆中果糖含量的测定
  
  • 前处理：精液液化后1小时内2500转离心15分钟，收集上清液待测。
    
  • 计算举例：
    取精浆按1:4的比例加入双蒸水，混匀后待测，实验测得标准管OD值为0.267，测定管OD值为0.255，则计算结果如下：
    

    精浆中果糖含量 (mg/mL)	＝	OD值测定管	×	标准品浓度 (1mg/mL)	×样本测试前稀释倍数
    		OD值标准管
    	＝	0.255	×1×4＝4.78mg/mL
    		0.267

• 动物组织中果糖含量的测定
  
  • 前处理：精确称取组织重量，按重量(g):体积(mL)＝1:4的比例加入双蒸水，制成20%组织匀浆，2500转/分，离心10分钟，取上清液待测。
    注：
    ① 针对组织匀浆液浓度大，蛋白含量高，反应液浑浊，建议反应结束冷却后4000转/分，离心10分钟后取上清测定。
    ② 蛋白浓度测定可选购本公司的考马斯亮蓝法蛋白定量试剂盒（货号：SNM152）
    
  • 计算举例：
    精确称取大鼠睾丸组织，按1:4的比例加入双蒸水，制成20%组织匀浆，2500转/分，离心10分钟，取上清待测。测得标准管OD值为0.267，测定管OD值为0.110，20%大鼠睾丸匀浆的蛋白含量9.37mg/mL，则计算结果如下：
    

    组织中果糖含量 (mg/g蛋白)	＝	OD值测定管	×	标准品浓度 (1mg/mL)	÷	20%匀浆蛋白浓度 (gprot/mL)
    		OD值标准管
    	＝	0.110	×1÷(9.34×10-3)＝44.11mg/gprot
    		0.267

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